发明人：张锐、章超桦、秦小明
专利号：ZL201210325168.0
授权公告日：2014年07月30日
本发明公开一种我国南方沿海染毒贝类和有毒赤潮藻的麻痹性贝毒的主要成分之一膝沟藻毒素GTX2,3（ gonyautoxin，GTX2, 3)免疫快速检测方法的基础: GTX2,3人工抗原的制备。与大分子载体蛋白小牛血清白蛋白（BSA）及匙血蓝蛋白（KLH）偶联制备人工抗原的方法；该方法是用乙二醛在半抗原分子GTX2,3第2号和8号位亚氨位上引进1 个自由的氨基，再用2步法将此中间产物( H2N- GTX2,3) 分别与载体蛋白BSA 和KLH 偶联. 中间产物和偶联产物分别经超滤纯化后, 经全波段紫外扫描和HPLC鉴定，结果表明H2N- GTX2,3与BSA和KLH 的平均偶联比能达到11.5 以上。膝沟藻毒素GTX2,3与载体蛋白的摩尔质量比为12∶1。 用制备的人工抗原GTX2,3-醛-BSA免疫BalB/C小鼠，通过间接ELISA检测抗体效价达到1:1.24万倍和Western-blot鉴定结果表明本研究成功地制备了膝沟藻-麻痹性贝类毒素GTX2,3人工抗原，同时其具备较强的免疫原性。该方法能够有效地制备出膝沟藻毒素GTX2,3人工抗原，从而生产出识别膝沟藻毒素GTX2,3的抗体，
本专利方法应用于制备膝沟藻毒素GTX2,3的单克隆抗体，从而规模化生产膝沟藻毒素GTX2,3双单抗夹心ELISA快速检测GTX2,3的试剂盒和快速检测试纸条。 用于现场 快速检测膝沟藻毒素GTX2,3，简便可行，无需特别的仪器设备，成本低廉。
