发明人：孙力军，王雅玲、刘阳、徐德峰、聂芳红、刘唤明
专利号：ZL201110288372.5
授权公告日：2014年3月5日
本发明以磁珠为载体，人IgG为识别中间体，经过活化-偶联-洗涤-封阻的过程制备出人IgG免疫磁珠，在合适的缓冲液中于一定条件下孵育可以高效捕捉、富集检测样本中的金黄色葡萄球菌；该方法特异性强，高效快速，操作简单，价格低廉，不需要大型仪器和特殊培训的专业操作人员，样品不需要特殊前处理，可广泛用于食品、饲料、化妆品、环境和临床金黄色葡萄球菌的富集分离与检测。
本发明首次将活化剂（EDC和NHS）活化后的磁珠应用于金黄色葡萄球菌免疫磁珠的制备，根据金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）分子与人IgG特异性结合的原理富集金黄色葡萄球菌，特异性强，高效快速。目前人IgG产品在国内已商品化，和金黄色葡萄球菌免疫血清相比，纯度高，性能稳定，成本低廉；制备出的免疫磁珠稳定性好，分离效率高，价格低。本发明利用上述原理经磁珠类型及活化剂的选择、抗体-磁珠偶联和IMB-菌体捕获等条件优化，建立了利用人IgG免疫磁珠对样品中的金黄色葡萄球菌进行富集的方法，较先前相关研究大大提高了检测灵敏度（由100CFU/ml提高到2.6CFU/ml），与国标法GB/T 4789.10-2010相比，也显著地提高了检测下限，缩短了检测时间（由55小时缩减到26.5小时）。本发明用于富集金黄色葡菌球菌的人IgG免疫磁珠的制备方法操作简单，不需要大型仪器和特殊培训的专业人员，样品不需要特殊前处理，可广泛应用于食品、饲料、化妆品、环境和临床中金黄色葡萄球菌的分离与检测。
