《GHR-AS与Let-7b在鸡肝脏细胞中竞争性调控GHR mRNA的机制研究》广东省科技成果登记公示

登记日期：

2021-03-05

完成单位：

广东海洋大学

完成人员：

张丽,张权,吴江,李婷,王章,徐海冬,李艳青

研究起止日期：

2017-05-01至2020-05-01

主要应用行业：

农、林、牧、渔业

社会经济目标：

农林牧渔业发展

评价单位：

广东省科学技术厅

评价日期：

2020-08-21

成果简介：

本成果由广东省自然科学基金资助完成。生长激素受体基因(Growth Hormone Receptor，GHR)是动物生长轴中的关键基因，直接影响动物的生长发育，如矮小鸡就与GHR基因突变有关。本项目组前期分析鸡肝脏组织转录组数据时发现GHR基因双向转录，即GHR基因在肝脏组织中不仅具有GHR mRNA转录本(GHR sense transcript，GHR-S)，同时具有与之方向相反的反义链转录本(GHR antisense transcript，GHR-AS)。在转录后水平，前人已经证实GHR mRNA (GHR-S)是小分子RNA Let-7b的靶基因，在GHR 3'UTR区缺失的矮小型鸡中GHR基因逃避了Let-7b的调控，从而转录水平显著升高，而我们发现GHR-AS 5'UTR与GHR-S 3'UTR区序列反向互补，如果两者能够在该区域形成双链RNA，GHR-AS可能会与小分子RNA Let-7b竞争性结合GHR-S的3'UTR，并参与机体发育调控。为了解GHR基因内源竞争性RNA网络(competing endogenou RNA，ceRNA)，我们以粤西地区信宜怀乡鸡为研究对象，分离培养其肝脏原代细胞，通过RNA酶保护实验等方法重点分析：①GHR-S与GHR-AS能否在3'UTR区形成双链RNA；②形成的双链RNA对GHR-S稳定性和翻译的影响；③解析GHR-AS和Let-7b竞争结合GHR-S 3'UTR区的机制以及对肝细胞生物学特性的影响。通过上述研究，了解GHR-AS调控GHR-S的作用机理，进一步明确GHR涉及的调控通路，丰富和完善鸡GHR基因的转录机制，为动物基因复杂调控机制研究提供基础数据和参考，并为家禽发育调控、确立分子育种新靶点提供依据。